| 遗传繁育 |
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| 鸡鸭异种间转基因嵌合体的制备
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李林凤1，浦亚斌2，宫雪莲2，白春雨2，白秀娟1*，关伟军2*
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1. 东北农业大学动物科技学院，哈尔滨 150000；2. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京100193
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收稿日期 2009-2-13
修回日期
网络版发布日期
接受日期
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摘要 为研究异种间嵌合体的制作方法及供体和受体的嵌合情况，同时探讨绿色荧光蛋白（pEGFPN3）基因作为报告基因在转基因动物制作中的应用价值。本研究利用脂质体介导法将外源pEGFPN3质粒转入到北京鸭原始生殖细胞（PGCs）中，将转染后的PGCs以微注射法转移至受体北京油鸡的胚下腔，探索转基因鸡鸭嵌合体的制作方法。结果显示：PGCs在转染后6 h开始有外源基因的表达，体外培养24 h后获得了33.6%的转染效率。120枚蛋在整个孵化期中共有33枚鸡胚发育，但最终无孵化成活鸡。在13个鸡胚中检测到有外源基因的存在，阳性率为10.8%。PCR扩增禽类W染色体特异性的重复序列发现，8只嵌合体公鸡的性腺都嵌合了供体异性的细胞。研究结果表明所采用的嵌合体制作方法制备转基因禽类是可行的。鸭PGCs能够迁移并定居到鸡胚性腺中，并有可能在鸡性腺中增殖分化成有功能的配子。
关键词
鸡；鸭；原始生殖细胞；种间嵌合体；转基因鸡；pEGFPN3
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